Xây dựng quy trình phát hiện gen kháng penicillin của vi khuẩn Staphylococcus aureus bằng kỹ thuật polymerase spiral reaction (PSR)

Người thực hiện: Vũ Quang Hiếu

Tóm tắt kết quả: Trong nghiên cứu này, chúng tôi phát triển phương pháp trực quan phản ứng phân tử nhằm phát hiện chủng Staphylococcus aureus kháng penicillin dựa trên phản ứng xoắn ốc polymerase (PSR). Phương pháp cho phép phản ứng trong điều kiện đẳng nhiệt bằng cách sử dụng enzyme Bst DNA polymerase và hai cặp mồi được thiết kế nhắm mục tiêu vào gen blaZ mã hóa tính kháng penicillin ở S. aureus. Khi khảo sát điều kiện phản ứng cho thấy, ở nhiệt độ 65oC và nồng độ cặp mồi F2/R2 = 0,1 µM và F1-Nr/R1-N = 1,6 µM, thì phản ứng PSR cho kết quả tối ưu chỉ trong vòng 50 phút. Giới hạn phát hiện của phương pháp PSR với DNA bộ gen và tế bào vi khuẩn lần lượt là 10 pg/μL và 5 CFU/mL trên mỗi phản ứng, nhạy gấp 2 lần so với phương pháp PCR. Ngoài ra, phương pháp này cho thấy đặc hiệu cao, do không xảy phản ứng chéo với các chủng vi khuẩn gây bệnh khác. Những kết quả này cho thấy phương pháp xét nghiệm PSR là dễ dàng và đáng tin cậy. Phương pháp có tiềm năng và có thể được phát triển ứng dụng để kiểm tra và khảo sát thực trạng kháng penicillin của S. aureus trong bệnh viện và cộng đồng.